山東實驗中學必修四模塊檢測

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『肆』 高中生物必修一檢測蛋白質的實驗

folin—酚試劑法。

此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即folin-酚試劑，以回增加顯色量，從而答提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是在鹼性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。

folin-酚試劑中的磷鉬酸鹽-磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。在一定的條件下，蘭色深度與蛋白的量成正比。

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注意事項：

樣品應是均勻的，若是固體樣品應事先研細過篩，液體樣要混合均勻。

樣品放入凱氏燒瓶時，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結果偏低。

如果稱1g以上的樣品，就需要K氏燒瓶最小500ml，800~1000ml的更好，這樣的K氏燒瓶對於縮短氨化時間，加熱的均勻性和完全氨化效果最好。

向蒸餾瓶中加入濃鹼時，往往出現褐色沉澱。這時由於分解促進劑與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱，有時Cu離子與氨作用生成深蘭色的絡合物。

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